pTOPO-TA-Blunt Simple Kit

产品介绍：

     本制品和传统的T4连接酶原理不同，它利用了Topoisomerase可以在瞬间（几秒钟-几分钟）、高效连接DNA片段的原理采用本公司工艺制成。

1. 可以在瞬间（几秒钟-几分钟）完成任意PCR产物（兼容A末端/平末端）连接。

2. 特制的新型载体质粒大小不到2kb，充分发挥了TOPO载体越小，可容纳片段越大的优势，大限度提高了大片段连接效率；连接后质粒大小比传统载体小2kb以上，质粒越小，转化效率越高，极大的提高了各种片段连接后的转化子数量。

3. 采用氨苄抗性载体只需10分钟复苏时间，比卡那抗性载体1小时复苏时间缩短6倍。

4. zui快可以不用冰浴和热休克，室温5分钟内完成转化；无需1小时复苏，只需37℃10分钟复苏便可以涂板。从连接到涂板zui快只需15-20分钟。

5. 自sha基因零背景原理，无自连假阳性，无需繁琐蓝白斑筛选和菌落PCR筛选。大部分情况下随机挑一个克隆便是有插入的。

6. 连接长片段能力远超传统TA/Blunt克隆载体，可连接长达10kb片段（例如连接5kb片段，也可能达到挑10个菌落，至少8个是有插入的效果），是新一代的简单、快速、零背景免筛选的TOPO TA/Blunt克隆载体。

本制品在克隆插入位点两侧不含多克隆酶切位点（Simple），需要时可在PCR 扩增引物上导入合适的酶切位点。此时如果使用PCR 扩增引物导入的酶切位点进行酶切时，酶切反应将不会受到载体上其它多克隆酶切位点影响，可提高酶切效率，增加亚克隆成功率。

注意：测序只能采用M13F/M13R 通用引物测序（见后面图谱），但是不能采用M13(-47)/M13(-48)通用引物测序。菌落PCR 可使用和测序相同的引物。