Hygromycin B 潮霉素B 1g 10g 50g
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 |
Hygromycin B 潮霉素B
| HRA1111 | 1 g |
| HRA1112 | 10 g | |
| HRA1113 | 50 g |
产品描述
潮霉素B（Hygromycin B）是由吸水链霉菌（Streptomyces hygroscopicus）代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素，通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成，从而杀死原核（如细菌）、真核（如酵母菌，真菌）和高等哺乳动物真核细胞。
大肠杆菌（ Escherichia coli.）来源的潮霉素抗性基因（hyg或hph），编码潮霉素B磷酸转移酶，将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物，从而起到解毒作用。针对这一原理，潮霉素B是一种非常有用的选择性标记，用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外，由于作用模式的差异，常与G418 (GeneticinTM)，Zeocin和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂，因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞，且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。
产品性质
描述 | 内容 |
CAS号（CAS NO.） | 31282-04-9 |
分子式（Formula） | C20H37N3O13 |
分子量（Molecular Weight） | 527.52 g/mol |
外观（Appearance） | 白色至淡黄色至褐色粉末 |
纯度（Purity） | ＞90% by HPLC |
溶解性（Solubility） | 易溶于水 |
活力（Potency） | ≥1050 U/mg |
结构式（Structure） |
运输和保存方法
冰袋运输。-20℃干燥保存，有效期2年。
注意事项
1. 潮霉素B的抗性基因（hyg或hph）除了来自E. Coli.之外，还发现于其他的菌株，包括Streptomyces hygroscopicus和Klebsiella pneumoniae。
2. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
3.本产品仅作科研用途！
使用方法
1. 储存液的配制（50 mg/mL）
称取0.5 g 潮霉素B加入10 mL 1×PBS，PH 7.4，充分溶解后用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成单次使用的小量（如1 mL）放到-20℃冻存，1年稳定。
2. 常用筛选浓度
潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型，培养基，生长条件和细胞代谢率而变化，推荐使用浓度为50-1000 μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线（kill curve），即剂量反应性曲线，来确定最佳筛选浓度。一般而言，哺乳动物细胞：50-500 μg/mL；细菌/植物细胞：20-200 μg/mL；真菌：300-1000μg/mL。
3. 杀灭曲线的建立
【注意事项】：为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株，需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素浓度，可通过建立杀灭曲线来实现，建议至少选择5个浓度。
1）第一天：未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上，37℃，CO2培养过夜。
【注】：对于需要更高密度来检测活力的细胞，可增加接种量。
2）根据细胞类型，设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000 μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/mL，然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。
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