为帮助大家能更深入了解深层过滤，现已正式上线《深思熟“滤”》系列性深层过滤知识课堂，今天为大家带来本系列第四篇内容。
采用了深层过滤技术诞生的深层过滤器产品在生物医药行业有着普遍的应用，主要在于料液的澄清和除杂。
除上篇所讲述的CHO细胞发酵生产单抗的应用之外，本篇还将讲述LeClafine®的最新案例分享(1)及其他可应用的细胞类型介绍。
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实验案例分享
1) 案例背景
客户A利用昆虫细胞进行猪圆环灭活疫苗的生产，料液下游纯化工艺步骤如下：
① 料液离心处理
② 发酵液澄清过滤(一般采用深层过滤等方式)
③ 层析
④ 除菌
2) 挑战点
由于深层前料液已经过离心，因此浊度一般不高。与CHO细胞发酵液不同，其一般采用单级过滤。
目前客户A离心后料液中蛋白浓度一般不高，因此在经过深层过滤时应更注重在载量和蛋白回收率两方面，其滤后浊度一般小于50NTU即可(各家要求不同，请区分看待)。
3) 测试结果
采用单级深层过滤的方式进行除杂澄清，第一次进行选型鉴定，第二次进行重复测试确定结果。本次以第二次重复测试结果作为展示。(2)
由上表可见，应用LeClafine®深层过滤器相关料液进行过滤，有较好的除杂效果，且在回收率和载量两方面有较好的表现，可以满足客户的需求。
LeClafine®已应用的细胞类型一览(下)
293细胞
293细胞是人上皮细胞系，常见的衍生株如HEK293、293T等，来源都是人胚胎肾细胞，较容易转染，是一个常见的表达研究外源基因的细胞株。
BHK细胞
BHK细胞(Baby Hamster Syrian kidney),叙利亚幼地鼠肾细胞，常用的细胞为BHK-21，即BHK细胞系的亚克隆细胞系，C13。原始的细胞株是成纤维细胞，贴壁依赖性。1963年获得单细胞克隆细胞。后经无数次传代后细胞可悬浮生长，广泛用于增殖各种病毒，生产兽用疫苗。
口蹄疫疫苗多数用此细胞。
MDCK细胞
MDCK细胞(madin-darby canine kidney)细胞系是以马丁达比犬肾上皮细胞为原型演变而来。因MDCK细胞与小肠上皮细胞生理特性类似，而常用于体外药物吸收特性的研究，且MDCK细胞培养周期较短，可以更快速的用于抑制剂的筛选及底物的鉴定。
由于其病毒感染效率高、增殖快，且不易变异，MDCK细胞系被认为适于甲、乙型流感病毒疫苗生产的3种细胞系之一。
禽流感病毒疫苗多数用此细胞。
Marc-145
猴胚胎肾上皮细胞是上皮样细胞，来源于猴肾细胞，从母细胞(MA104细胞)克隆而得到，可连续传代培养。Marc-145细胞主要用于病毒的培养，特别是猪繁殖与呼吸障碍综合病毒(PRRSV)对此细胞尤为敏感。
猪蓝耳病毒灭活疫苗多数用此细胞。
昆虫细胞
可用昆虫细胞发酵来进行猪圆环病毒灭活疫苗的生产。
大肠杆菌
培养大肠杆菌用于重组蛋白或质粒的生产。大肠杆菌培养周期短，较容易到达一个比较高的数量级。
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