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人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒的实验使用说明书

  • 资料类型

    doc
  • 文件大小

    16.5KB
  • 上传时间

    2025年01月16日
关键词
末端脱氧核苷酸转移酶,ELISA试剂盒,TdT 试剂盒,人试剂盒,封板膜
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资料简介

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  人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒的实验使用说明书通常包含以下几个关键部分:产品概述、试剂盒组成、样本处理、实验步骤、结果计算、注意事项以及存储条件等。以下是一个基于多个来源综合整理的人末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)ELISA试剂盒的实验使用说明书概要:

  一、产品概述

  本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的含量。采用双抗体夹心法,通过形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,并利用TMB显色系统来定量检测TdT水平。

  二、试剂盒组成

  试剂盒通常包含以下组件:

  酶标包被板

  标准品及标准品稀释液

  酶标试剂

  样品稀释液

  显色剂A液和B液

  终止液

  浓缩洗涤液

  封板膜

  密封袋

  说明书

  三、样本处理

  ‌血清‌:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。

  ‌血浆‌:使用EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后离心。收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  ‌尿液‌:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

  ‌组织标本‌:切割标本后称重,加入PBS(pH7.4)并匀浆。离心后收集上清,分装后一份待检测,其余冷冻备用。

  四、实验步骤

  ‌标准品稀释‌:按照说明书要求,在酶标包被板上设标准品孔,并进行系列稀释。

  ‌加样‌:分别设空白孔、标准孔和待测样品孔。在酶标包被板上加入样品稀释液和待测样品。

  ‌温育‌:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

  ‌洗涤‌:揭掉封板膜,弃去液体,每孔加满洗涤液后静置并弃去,重复5次后拍干。

  ‌加酶‌:每孔加入酶标试剂(空白孔除外)。

  ‌再次温育和洗涤‌:重复温育和洗涤步骤。

  ‌显色‌:每孔加入显色剂A和B,轻轻震荡混匀后37℃避光显色10-15分钟。

  ‌终止‌:每孔加终止液终止反应。

  ‌测定‌:以空白孔调零,在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值)。

  五、结果计算

  以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线。根据样品的OD值在标准曲线上查出相应的浓度,再乘以稀释倍数即为样品的实际浓度。

  六、注意事项

  试剂盒从冷藏环境中取出后应在室温平衡15-30分钟后方可使用。

  浓洗涤液稀释时如有结晶析出,可在水浴中加温助溶。

  各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性。

  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

  底物应避光保存。

  严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。

  七、存储条件

  试剂盒通常应存放在2-8℃的冷藏环境中,避免阳光直射和潮湿。不同批号的试剂组分不得混用。

  请注意,具体实验步骤和条件可能因试剂盒品牌和型号的不同而有所差异。因此,在实际操作中应严格遵循所使用试剂盒的说明书进行。


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