资料简介
人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒说明书概要
一、产品基本信息
产品名称:人低密度脂蛋白受体相关蛋白1B(LRP1B)ELISA试剂盒
用途:用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液等人源样本中的LRP1B浓度,仅限科研实验使用。
规格:48T/96T(T代表测试次数或孔数)。
保质期:一般为6个月至12个月,具体以试剂盒外包装标签为准。
二、试剂盒组成
预包被酶标板:含有固定量的抗LRP1B抗体。
标准品:用于绘制标准曲线,已知浓度的LRP1B蛋白溶液。
样本稀释液:用于稀释样本,以便在检测范围内进行测量。
检测抗体:标记有酶(如辣根过氧化物酶)的抗LRP1B抗体。
洗涤液:用于洗涤酶标板,去除未结合的物质。
底物:如TMB,与酶反应产生颜色变化,用于检测。
终止液:停止酶反应,使颜色变化稳定。
使用说明书:详细操作步骤、注意事项等。
三、检测原理
采用抗体夹心法:样本中的LRP1B与预包被在酶标板上的抗体结合,再加入标记有酶的抗LRP1B抗体形成复合物。经过洗涤去除未结合的物质后,加入底物产生颜色变化。颜色深浅与样本中的LRP1B浓度呈正相关,通过酶标仪测量吸光度值,计算样本浓度。
四、样本准备与保存
样本收集:使用无热原、无内毒素的试管收集血清或血浆样本,避免溶血、高血脂样本。组织匀浆或细胞上清液样本需离心去除沉淀。
样本保存:样本应尽早检测,若不及时检测,应分装后冷冻保存(-20℃或-80℃),避免反复冻融。
五、操作步骤
加样:向酶标板中加入标准品和稀释后的样本。
孵育:在温度和时间内孵育,使样本中的LRP1B与抗体结合。
洗涤:使用洗涤液洗涤酶标板,去除未结合的物质。
加检测抗体:向酶标板中加入标记有酶的抗LRP1B抗体,孵育。
再次洗涤:重复洗涤步骤。
加底物显色:向酶标板中加入底物,孵育使颜色发展。
终止反应:加入终止液停止反应。
读板:使用酶标仪在波长下测量吸光度值。
六、注意事项
严格按照说明书操作,避免交叉污染。
加样时应确保每孔体积一致,避免产生气泡。
孵育时间和温度需严格控制。
洗涤步骤应充分且。
读取结果时应在终止反应后的规定时间内进行。
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