小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒实验使用说明书

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　　BS-2220  小鼠β淀粉样蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA试剂盒

　　一、实验原理

　　采用双抗体夹心法ELISA技术。将抗Aβ1-42抗体预包被于微孔板，加入样本和标准品后，与HRP标记的检测抗体形成复合物，经TMB显色后通过酶标仪测定OD值，颜色深浅与Aβ1-42浓度呈正相关‌12。

　　二、试剂盒组成

　　‌主要组分‌：

　　预包被微孔板(96T/48T)

　　标准品(浓度通常为160-400pg/mL)‌24HRP标记检测抗体‌3TMB显色液及终止液‌15浓缩洗涤液(需稀释使用)‌38‌保存条件‌：

　　未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期6个月‌14开封后：建议分装冻存于-20℃(避免反复冻融)‌46三、样本处理

　　‌血清/血浆‌：

　　采集后需离心(1000×g，10-30分钟)，分离上清‌14避免溶血或脂血样本‌45‌组织匀浆/细胞上清‌：

　　离心去除沉淀后取上清检测‌46四、操作步骤

　　‌标准品稀释‌：按说明书梯度稀释(通常为2-90pg/mL范围)‌25‌加样与孵育‌：

　　每孔加入样本或标准品100μL，37℃孵育1-2小时‌13‌洗涤‌：使用稀释后的洗涤液洗板3-5次‌38‌显色与终止‌：

　　加入TMB显色10-15分钟，终止液终止反应‌15‌检测‌：

　　450nm波长读取OD值，绘制标准曲线计算浓度‌25五、注意事项

　　‌质量控制‌：

　　板内/板间变异系数应<10%‌5回收率建议在84-101%范围内‌5‌操作规范‌：

　　避免使用金属头移液器接触底物‌3不同批号试剂不可混用‌36六、结果判读

　　典型标准曲线范围：15.62-1000pg/mL，检测限通常<31.25pg/mL‌57。建议每次实验独立建立标准曲线‌5。

　　如需具体品牌试剂盒的完整说明书，可提供供应商名称进一步查询。