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植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA试剂盒实验使用说明书

  • 资料类型

    doc
  • 文件大小

    16KB
  • 上传时间

    2025年04月16日
关键词
植物醇溶谷蛋白,标准品,Elisa试剂盒,酶标板,本生试剂盒
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资料简介

  以下是植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA试剂盒的实验使用说明书,综合整理自相关技术资料:
 
  BS-4955  植物醇溶谷蛋白(ASP)ELISA试剂盒
 
  一、实验原理
 
  采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。预先包被ASP捕获抗体的微孔板中依次加入标本、标准品和HRP标记检测抗体,经温育洗涤后,通过TMB显色反应(蓝色→黄色)实现定量检测,颜色深浅与ASP浓度呈正相关‌。
 
  二、样本处理要求
 
  血清‌
 
  采集后室温静置2小时或4℃过夜,1000×g离心20分钟取上清
 
  避免反复冻融,建议-20℃/-80℃保存‌
 
  血浆‌
 
  需使用EDTA/肝素抗凝剂,采集后30分钟内2-8℃ 1000×g离心15分钟‌
 
  组织匀浆‌
 
  建议使用预冷PBS(pH7.4)制备匀浆液‌
 
  三、操作步骤
 
  将试剂平衡至室温(约30分钟)‌
 
  分别加入标准品、待测样本至对应微孔(建议做复孔)‌
 
  加入HRP标记抗体,37℃温育60分钟‌
 
  洗板5次(每次静置30秒弃液)‌
 
  每孔加入TMB显色液,避光反应15分钟‌
 
  加入终止液,15分钟内450nm波长测OD值‌
 
  四、注意事项
 
  保存条件‌:试剂盒需2-8℃避光保存,有效期6个月‌
 
  安全规范‌:
 
  禁止用嘴吸取试剂‌
 
  避免接触终止液/TMB,若接触立即冲洗‌
 
  质量控制‌:
 
  板内变异系数<10%,板间<15%‌
 
  空白OD值应≤0.08‌
 
  五、结果计算
 
  以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,通过曲线方程计算样本浓度‌。检测范围通常为0.25-8ppm‌。
 
  (注:具体操作请以试剂盒内附说明书为准,本说明综合了不同厂家的通用流程‌)
 
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