甲状腺素游离T4检测试剂盒elisa(酶联免疫法),科润达生物代理
【产品名称】
通用名称:游离T4检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Free T4 ELISA
【产品规格】
96T
【预期用途】
甲状腺素游离T4检测试剂盒elisaEIA-3775可用于人血清和血浆(EDTA,肝素或柠檬酸盐血浆)中FT4(游离甲状腺素)的体外定量检测。
【前言简介】
L-甲状腺素(T4)或3,5,3,5-四碘甲甲状腺素是由甲状腺合成的,并分泌到血液中。在此,T4与血清转运蛋白结合,仅留下约0.03%的游离T4(fT4)。主要转运蛋白是甲状腺素结合球蛋白(TBG),通常占结合T4的70%。其他甲状腺激素结合蛋白是甲状腺素结合白蛋白和白蛋白。
T4对几乎所有组织的蛋白质合成和耗氧量都有主要影响,但对于生长,发育和性成熟也很重要。
甲状腺由促甲状腺激素释放激素(TRH)和促甲状腺激素(TSH)调节。除了通过甲状腺激素反馈调节TRH / TSH外,营养信号(如瘦素)以及调节食欲的肽还具有中枢调节作用。如果TSH浓度超出正常范围,则fT4浓度的测量被认为是有价值的参数。由于fT4代表血清中T4的代谢活性部分,因此它反映了甲状腺的实际激素产生。原发性甲状腺功能减退症会导致甲状腺T4生成不足,从而导致血液中循环fT4浓度异常低。原发性甲状腺功能亢进症会导致甲状腺过度产生T4并导致fT4浓度升高。
【检测原理】
本试剂盒是基于竞争结合原理的固相酶联免疫吸附测定(ELISA)。微量滴定孔用抗T4分子特异性抗原位点的单克隆(小鼠)抗体包被。患者样品的内源FT4与T4辣根过氧化物酶联物竞争与包被抗体的结合。孵育后,将未结合的结合物洗掉。结合的过氧化物酶结合物的量与样品中FT4的浓度成反比。添加底物溶液后,显色的强度与患者样品中FT4的浓度成反比。
【储存条件】
当储存在2°C-8°C下时,未打开的试剂将保留反应性直到有效期。在此日期之后请勿使用试剂。
打开的试剂必须存储在2°C-8°C下。微量滴定孔必须存储在2°C-8°C下。铝箔袋打开后,应小心再次将其密封。如果按照上述说明存放,打开的试剂盒可保留8周的活性。
【实验步骤】
每次运行必须包含一条标准曲线。
1. 在框架固定器中固定所需数量的微量滴定孔。
2. 用新的一次性吸头分配每种标准品,质控品和样品的50 µL到适当的孔中。
3. 在每个孔中分配100 µL酶联物。充分混合10秒钟。在此步骤中进行充分混合非常重要。
4. 在室温下孵育60分钟。
5. 轻摇孔中的内容物。每孔用400 µL稀释的洗涤液冲洗孔4次。在吸收纸上用力猛击孔,以除去残留的液滴。重要说明:此检测方法的灵敏度和精密度受洗涤正确性能的明显影响程序!
6. 向每个孔中加入150 µL底物液。
7. 在室温下孵育30分钟。
8. 通过向每个孔中添加100 µL终止液来终止酶促反应。
9. 用酶标仪测定450±10 nm处每个孔的吸光度(OD)。建议在添加终止液后的10分钟内读取孔。
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