大拟片形吸虫PCR检测试剂盒说明书

特点：
高特异性：与其他病毒无交叉反应，无非特异性扩增；
高灵敏度：检测灵敏度可达10~100；
操作简便：该系列所有试剂均采用相同的体系和条件，可同时进行多个检测；
高通量：多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

样品 DNA 的制备：
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液试用装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。
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使用及效果：
PCR反应特点
(1) 特异性强
PCR反应的特异性决定因素为：
①引物与模板DNA特异正确的结合；
②碱基配对原则；
③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性；
④靶基因的特异性与保守性。
其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

GBA3/CBGL1抗體,兔多抗112246-15-8HPLC≥98%A032820mg/支ELISA   (R型)人参皂苷Rh2

ELISAKitforHumanDiskslargehomolog416830-15-2 20mg Asiaticoside 31.2-2000 pg/mL积雪草苷

yndecan-3/SDC3抗體,兔多抗,抗原親和純化63902-38-5C32H42O16Pinoresinol，Diglucoside≥98%ELISA   WB   松脂二葡萄糖苷

人干扰素诱导的跨膜蛋白3(IFITM3)ELISA试剂盒81720-08-3 20mg Rehmannioside D 31.2-2000 pg/mL地黄苷D

绿脓菌素测定用培养基（PDP）500g 250gPEG4000 聚乙二

ELISAKitforHumanNADHdehydrogenase[ubiquinone]1alphasubcomplexsubunit61g 0.156-10 ng/mL6-溴-2-萘基-β-D-葡糖苷 BROMO-2-NAPHTHYL-b-D-GLUCOPYRANOSIDE, 6-(RG)

明胶316-04011 20支Taq Mut S（检测基因突变的酶）

人固调节元件结合蛋白2(SREBP-2)ELISA试剂盒5g 0.312-20 ng/mL大豆素 DAIDZEIN(RG)

人状腺癌细胞，FTC-133细胞 20mg HPLC≥98%Swertianolin23445-00-3用于含量测定1 x 10^6 cells/T25培养瓶当药苷

ELISAKitforHumanInhibinbetaBchain168293-14-9 3-O-Acetyl-16α-hydroxydehydrotrametenolic  acid

 0.156-10 ng/mL3-O-乙酰基-16α-羟基松苓新酸

嗜肺军团杆菌(LP)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法)33377-72-9 20mgTheaflavine-3,3'-digallate (TFBG) HPLC≥98% 0.312-20 ng/mL茶黄素-3,3'-双没食子酸

CD14抗體,鼠單抗 91-22-5 100mg 0.99FCM   喹啉

人C4b结合蛋白β链(C4BPB)ELISA试剂盒1009314-38-8 Onjisaponin O 78-5000 pg/mL远志皂苷O

CD131/CSF2RB/IL3RB/IL5RB抗體(APC),鼠單抗97682-44-5A0746FCM   伊立替康

ELISAKitforHumanFibroblastgrowthfactor555750-84-0 20mg Crocin II 78-5000 pg/mL西红花苷II

p63/TP63抗體,鼠單抗24211-30-1C17H16O5farrerol≥98%ELISA   杜鹃素

大拟片形吸虫PCR检测试剂盒说明书68858-20-8 | Fmoc-Val-OH|南京肽业  68858-20-8 Quoirin&LepoivreMediumwithvitamins

异橙黄；3’,4’ ,5,7,8-五氧基黄 20mg 3’,4’ ,5,7,8-pentamethoxyflavone ELISAKitforHumanCocaineesterase HPLC≥98%

1-溴-4-碘苯 1-Bromo-4-iodobenzene >98.0%(GC)  250G 人包含蛋白1的LETMD1结构域(LETMD1)ELISA试剂盒

芦荟甙 B ALOIN B(P)  5mg ELISAKitforHumanTransforminggrowthfactorbeta-1

三七皂苷R2(R型) HPLC≥94.50% A0635 CarboxypeptidaseA2/CPA2抗體,鼠單抗 20mg/支

升麻-3-O-β-D-木糖苷；升麻环氧苷 20mg Cimigenol-3-O-β-D -xylpyranoside ELISAKitforHumanRAC-alphaserine/threonine-proteinkinase HPLC≥98%

麦冬皂苷D；麦冬皂甙D  HPLC≥98% Ophiopogonin D 兔肝内胆管上皮细胞 用于含量测定

1-脱氧野尻霉素 20mg  1-Deoxynojirimycin 人铁蛋白轻链(FTL)ELISA试剂盒