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柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)

参考价1200.00-3500.00
具体成交价以合同协议为准
  • 公司名称上海抚生实业有限公司
  • 品       牌其他品牌
  • 型       号AS63218
  • 所  在  地上海市
  • 厂商性质代理商
  • 更新时间2023/10/13 9:45:45
  • 访问次数4771
规格
100管/48样3500.00元15 盒可售
50管/24样2200.00元15 盒可售
25管/12样1200.00元15 盒可售
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上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.China)是一家生物企业,主要从事免疫学、分子生物学和常规生化试剂的销售。主营产品:生化试剂、试剂盒、ELISA试剂盒、抗体、重组蛋白、生化检测试剂盒、分光光度法检测试剂盒、荧光定量PCR检测试剂盒、细胞株、原代细胞、细胞培养基、标准溶液产品。代理并销售进口SIGMA试剂、abcam抗体、R&D抗体、CST抗体、ATCC细胞、BD公司、GE公司、赛默飞世尔公司产品。

上海抚生实业有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.China)先后与天津中医学院、复旦大学、上海交通大学医学院、上海交通大学、华东师范大学、第二军医大学、南京大学,暨南大学,南京工业大学,曙光医院、华山医院、瑞金医院、上海有机研究所、中科院上海分院等多家单位建立了良好的合作关系。本公司可为您提供科研ELISA试剂盒,种属标本齐全,有专门针对人血清、血浆、全血、分泌物、尿液、细胞培养上清液、组织匀浆、组织液等标本的试剂盒;另有针对各种动物(鼠、兔、牛、马、鸡、猪、狗、山羊、猴、鱼)的科研试剂。

公司秉承“专注品质、信守承诺、积极沟通、创新服务”的企业文化积极参与生物领域的技术创新和技术服务,力求为我国科研事业更好的,更专业的服务!

公司售后服务宗旨:有质量问题可申请退换,有技术疑问可随时给于解答,一对一的客服服务,客户的需求也是我们不断的更新服务。









ELISA试剂盒
产地 国产 规格 100管/48样、50管/24样、25管/12样
级别 其他
柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。
柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法) 产品信息

本网站销售的所有产品均不得用于人类或动物之临床诊断或治疗,仅可用于工业或科研等非医疗目的。

货号

产品名称

规格

AS63218

柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)

100管/48样

AS63218

柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)

50管/24样

AS63218

柠檬酸合酶(CS)测试盒(比色法)

25管/12样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:                           

CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。

测定原理:

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水

试剂组成和配制:

试剂一:液体100mL×1瓶,-20℃保存;

试剂二:液体20mL×1瓶,-20℃保存;

试剂三:液体1.5mL×1支,-20℃保存;

试剂四:液体28mL×1瓶,4℃保存;

试剂五:粉剂×1瓶,4℃保存;

试剂六:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入1.2mL蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存;

样本的前处理:

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:

  • 称取约0.1g组织或收集500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂三,用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

  • 将匀浆600g,4℃离心5min。

  • 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心10min。

  • 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的CS(此步可选做)。

  • 在步骤④的沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),用于线粒体CS测定。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至412nm,蒸馏水调零。

2、样本测定

(1)在试剂五中加入0.6mL无水乙醇和13mL试剂四,混匀,37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;

(2)测定管:在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、220μL试剂五和10μL试剂六,混匀,37℃反应15min后立即测定吸光值A1。

(3)对照管:在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、220μL试剂四和10μL试剂六,混匀,37℃反应15min后立即测定吸光值A2。

(4)计算ΔA=A1-A2,每个测定管设一个对照管。

CS活性计算:

  1. 使用微量石英比色皿测定的计算公式如下:

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=117.6×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W× V样÷V样总)÷T=23.8×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.0475×ΔA

V反总:反应体系总体积,2.4×10-4 L;ε:TNB摩尔消光系数,1.36×104 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,15 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

  1. 使用96孔板测定的计算公式如下:

(1)按样本蛋白浓度计算:

单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样×Cpr) ÷T=235.3×ΔA÷Cpr

此法需要自行测定样本蛋白质浓度。

(2)按样本鲜重计算:

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(W ×V样÷V样总)÷T=47.5×ΔA÷W

(3)按细菌或细胞密度计算:

单位的定义:每1万个细菌或细胞每分钟催化产生1 nmol TNB定义为一个酶活力单位。

CS(nmol/min /104 cell)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(500×V样÷V样总)÷T=0.095×ΔA

V反总:反应体系总体积,2.4×10-4 L;ε:TNB摩尔消光系数,1.36×104 L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm;V样:加入样本体积,0.01 mL;V样总:加入提取液体积,0.202 mL;T:反应时间,15 min;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g;500:细胞或细菌总数,500万。

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公司正在出售的产品:

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