试剂盒名称:大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒
大鼠游离脂肪酸(FFA)ELISA试剂盒 的标本要求 :
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品货号:H1865Y
规 格:48T/96T
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的操作步骤:
用于检测未知抗原的双抗体夹心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。(简称洗涤,下同)。
2. 加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
4. 加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
5. 终止反应:于各反应孔中加入2M硫 酸0.05ml。
6. 结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
组成:
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | 2 |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6 ml×1瓶 | 2 |
终止液 | 3ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2 |
20倍浓缩洗涤液 | 20ml×1瓶 | 30ml×1瓶 | 2 |
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