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Certest腺病毒HEXON重组蛋白 Certest生物原料

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公司名称广州健仑生物科技有限公司
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所在地广州市
厂商性质经销商
更新时间2017/9/12 9:59:36
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Certest腺病毒HEXON重组蛋白 Certest生物原料产品信息

Certest腺病毒HEXON重组蛋白 Certest生物原料

Adenovirus HEXON recombinant protein

西班牙Certest公司

Certest生物原料禽腺病毒属于禽腺病毒科禽腺病毒属,根据其抗原性的不同可分为3个群,其中Ⅰ群禽腺病毒包含12个血清型。Ⅰ群禽腺病毒含有相同的群抗原,其中比较的病毒株有鸡胚致死孤儿病毒、鹌鹑支气管炎病毒、鸡包涵体肝炎病毒。所有年龄的家养禽均为易感,临床和病理症候群包括肝炎、再生障碍性贫血、出血、轻度呼吸道疾病和产蛋量减少。Ⅰ群禽腺病毒既可水平传播,也可垂直传播。Certest生物原料

Avian adenovirus belongs to the avian adenovirus avian adenovirus, according to its different antigenic can be divided into three groups, of which the group of avian adenovirus contains 12 serotypes. Group I avian adenoviruses contain the same group of antigens, among which the more well known strains are chick embryo-born orphans, quail bronchitis virus, chicken inclusion hepatitis virus. All age poultry are susceptible to clinical and pathological symptoms including hepatitis, aplastic anemia, bleeding, mild respiratory disease and reduced egg production. Group I avian adenovirus can be spread horizontally or vertically.

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Certest Biotec，S.L. 是一家独立的生物技术公司，致力于人类临床领域的IVD诊断产品的开发和制造。快速检测是基于快速、准确和易于操作的诊断产品。此外，Cerstest还有多种实时PCR产品，可以用于医院临床、实验室科研等。

Certest公司于2002年在萨拉戈萨成立，是一家创新技术型公司。公司的发展是基于新产品的开发、市场空间和机遇的探索，十几年来一直以高度专业化，以客户为导向，不断得创新，优化产品，专业知识，取得广大客户的信任和支持。Certest的质量体系已通过ISO 13485认证。

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根据GenBank上的CELO病毒六邻体(hexon)基因序列,通过软件比较禽腺病毒hexon氨基酸序列,结合二维结构图提示的多肽暴露情况以及抗原性预测分析,设计并合成了一对特异性引物,对禽腺病毒1型CELO株的hexon主要抗原性多肽片段进行PCR扩增,与PGEX-4T-1原核表达载体连接,转化大肠杆菌DH5a感受态细胞,经0.2mmol/L的异丙基硫代-β-D-半乳糖诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明,表达的融合蛋白分子量为72.24kD,占全菌蛋白的34%。Western-blotting结果表明:原核表达的hexon重组蛋白具有抗原性,能与感染FAV的阳性血清反应。另外,分别用不同浓度的尿素和Triton X-100对hexon重组蛋白进行包涵体纯化,蛋白的终浓度为30μg/mL。经BandScan4.3生物图象分析软件分析蛋白的纯度为85.0%。达到较高的浓度和纯度,说明本试验探索的纯化方法能有效的纯化这些重组蛋白。其次,将纯化的hexon蛋白作为包被用抗原进行间接酶联免疫吸附试验(ELISA),确定其包被浓度为10μg/mL;一抗稀释度为1:200;HRP酶标羊抗鸡IgG稀释度为1∶5000,重组蛋白不与NDV、AIV、EDSV、ARV阳性血清发生交叉反应,具有较好的特异性。本研究初步建立了能检测FAV抗体的重组蛋白ELISA诊断方法,用这种方法对FAV的12个血清型病毒免疫SPF鸡的血清进行检测,结果表明该方法在FAV抗体检测方面具有较高的敏感性。 zui后,根据GenBank中Ⅰ群禽腺病毒hexon基因的保守序列设计了一对引物,建立了检测Ⅰ群禽腺病毒12个血清型的SYBR GreenⅠ荧光PCR方法。以质粒DNA为标准品,建立了标准曲线及熔解曲线。同时进行了特异性、敏感性和重复性试验。结果显示,制作的标准曲线中各浓度范围内有较好的线性关系且线性范围宽;与AIV、IBDV等非Ⅰ群禽腺病毒不发生交叉反应,灵敏度达1×10~2拷贝/μL,表明具有较好的特异性和敏感性;重复性试验结果表明,具有良好的准确性。本方法从病毒核酸提取至检测完成仅需5h左右,操作简便快速,为快速、准确检测Ⅰ群禽腺病毒提供了一种有效的方法。

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