医药级乳酶生化学药原料药CDE备案登记

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本品为白色或淡黄色粉末，无糜烂臭或其他恶臭。 【鉴别】 （1）牛奶凝固力 取本品0.3g，加至20ml牛奶培育基（取新颖牛奶或市售纯牛奶，分装至100ml离心管，于4～8℃，以每分钟5000转离心5～10分钟，去除上层脂肪层；或取新颖牛奶置沸水浴中煮30分钟，于2～10℃放置18小时以上，使乳脂析出，取脱脂溶液。将制备好的脱脂牛奶分装于试管中，每管20ml，于115℃湿热灭菌20分钟。或取脱脂奶粉，制成10%～15%溶液，分装 ，于115℃湿热灭20分钟）中，摇匀，作为供试品管，取2管平行 实验；另取牛奶培育基20ml作为对看管，在37℃培育48小时（必要时延长至72小时）。对看管牛奶应无凝固现象，供试品管牛奶应凝固。 （2）染色镜检 自含量测定项下计数平皿中，选取具有透明圈的3～5个菌落涂片，革兰染色，镜检。应为阳性球菌，菌体呈单个、短链或成对排列。 （3）运动性检查 自含量测定项下计数平皿中，选取具有透明圈的不同形态菌落各2个，分别接种于含量测定项下的含糖牛肉汤培育基中，置37℃培育24小时，取培育物，以悬滴法察看。应无运动性。 （4）酸度 取鉴别（3）项下含糖牛肉汤培育物适量，接种于鉴别（1）项下牛奶培育基20ml中，作为供试品管；另取牛奶培育基20ml，作为对看管。分别置37℃培育48小时，取供试品管和对看管培育物各5ml，分别加水20ml和酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显淡红色，并坚持1分钟不褪。两者耗费氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）毫升数的差值，应不小于2ml。 （5）乳酸鉴别 取鉴别（4）项下供试品管和对看管的培育物各1ml，分别加10%硫酸溶液3~5滴，振摇，加乙约10ml，强力振摇，放置数分钟，取上层乙液，置水浴中，蒸去乙，残渣加水2ml，摇匀，各取0.2ml，分别加硫酸2ml，摇匀，置水浴中加热2分钟，取出，立即用冷水冷却，分别滴加10%愈创木酚的乙醇溶液1滴，振摇。对看管应显橙色，供试品管应显红色。 （6）生化反响 自含量测定项下计数平皿中，挑取具有透明圈的菌落适量，分别接种于山梨醇、L-阿拉伯糖、甘露醇、D-棉子糖生化管（取牛肉膏5g、蛋白胨5g、酵母浸膏5g、吐温80 0.5ml、琼脂1.5g与1.6%溴甲酚紫酒精溶液1.4ml，加蒸馏水溶解并稀释至1000ml，按0.5%参加所需糖类或醇类，分装小试管，115℃湿热灭菌20分钟）中，置37℃培育24～48小时。山梨醇、D-棉子糖反响呈阴性，L-阿拉伯糖、甘露醇反响呈阳性。 【检查】 枯燥失重 取本品，在105℃枯燥至恒重，减失重量不得过5.0%（通则0831）。 杂菌 取本品，照微生态活菌制品总论项下的办法检查（《中国药典》三部），非致病性杂菌数测定采用磷酸盐缓冲液营养琼脂培育基[每1000ml营养琼脂培育基（胨10.0g，氯化钠5.0g，牛肉浸出粉3.0g，琼脂14.0g，水1000ml，取上述成分混合，微温溶解，调理pH为弱碱性，煮沸，滤清，调理pH值使灭菌后为7.2±0.2）中，参加磷酸二氢钾3.56g、磷酸氢二钠7.23g，溶解，混匀，分装，121℃湿热灭菌20分钟]。除屎肠球菌外，1g供试品中含非致病菌性杂菌数不得过500cfu，含真菌数不得过100cfu，不得检出大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、沙门菌和志贺菌。 【含量测定】 培育基制备办法 培育基可按以下处方制备，也能够运用按该处方消费的契合请求的商品化培育基。配制后，应采用考证合格的灭菌程序灭菌。 1.含糖牛肉汤培育基 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 胨 10g 乳糖 20g 水 1000ml 取上述成分，混合，微温溶解，调理pH值使灭菌后为6.0，115℃湿热灭菌20分钟。 2.1%碳酸钙含糖牛肉琼脂培育基 按上述含糖牛肉汤培育基的处方和制法，参加溴甲酚紫0.06g、碳酸钙10g、琼脂15～20g，加热溶解，混匀，分装，115℃湿热灭菌20分钟。 测定法 接种与培育 无菌称取本品10g，加无菌的0.9%氯化钠溶液至100ml，加适量无菌玻璃珠，摇匀，制成1：10的混悬液，取上述混悬液，用无菌的0.9%氯化钠溶液梯度稀释。取3个连续适合稀释度的混悬液1ml，置无菌平皿中，每个稀释级至少2个平皿中，注入15～20ml温度不超越45℃的1%碳酸钙含糖牛肉琼脂培育基，混匀，凝固，倒置，于37℃培育48小时，察看结果。有透明圈的菌落为乳酸菌。 菌落计数 选取均匀菌落数为10～300cfu的稀释级，作为菌落报告的根据。以最高的均匀菌落数乘以稀释倍数的值报告每1g样品所含的活乳酸菌数（取两位有效数字，若两个平皿的菌落数相差1倍以上，需重新实验）。 【类别】 助消化药。 【贮藏】 密封，遮光，在凉暗处保管。