人COX-2(环氧化酶)检测试剂盒又称为人COX-2检测试剂盒(酶联免疫法),日本IBL品牌,科润达生物代理
【产品名称】
通用名称:人COX-2检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Human COX-2 Assay Kit
【规格】
96T
【预期用途】
人COX-2(环氧化酶)检测试剂盒可用于定量检测人细胞提取物中的环氧化酶-2(COX-2)。本产品仅用于研究,不用于诊断。
【前言简介】
环氧化酶(COX)是一种膜结合酶,负责将花生四烯酸氧化为前列腺素G2(PGG2),随后将PGG2还原为PHG2。这些反应是形成各种前列腺素的第一步。COX已被证明以至少两种不同的亚型表达,即组成型表达形式COX-1和诱导型COX-2。COX-1被认为可以调节许多家务功能,如血管止血、肾血流和肾小球功能的维持。炎症介质,如生长因子、细胞因子和内毒素,在许多细胞系统中诱导COX-2的表达。
【检测原理】
本试剂盒基于ELISA固相夹心法原理,微孔板上包被了一抗,将样本和标准品加入微孔中进行第一次反应。反应后,加入HRP-二抗共轭物进行第二次反应。洗涤除去未结合的二抗后,加入TMB底物液进行颜色反应。
【试剂盒组分】
1)微孔板: 96孔,包被抗人COX-2(13H14)小鼠IgG单克隆抗体
2)标记抗体: 30倍浓缩,1x0.4ml,HRP-抗人COX-2兔IgG Fab’亲和纯化
3)标准品: 2x0.5ml,重组人COX-2
4)EIA缓冲液: 1x30ml
5)标记抗体溶液: 1x12ml
6)底物液: 1x15ml
7)终止液: 1x12ml
8)洗涤缓冲浓缩液: 1x50ml,40倍浓缩
【储存】
试剂盒应储存于2-8℃中,其有效期在试剂盒上注明,不要使用过期试剂。
【检测步骤】
(1)取1孔作为样本空白,加入100µL EIA缓冲液
(2)将100µL标准品和样本加入相应的孔中
(3)封板,在37℃下孵育60分钟
(4)弃去孔中内容物,每孔加入350µL洗涤缓冲液洗涤4次,结束后在吸水纸上拍打微孔板以除去残留液体
(5)将100µL标记抗体加入所有孔中
(6)封板,在2-8℃下孵育30分钟
(7)重复洗涤步骤,需洗涤5次
(8)将100µL底物液加入所有孔中
(9)在室温下孵育30分钟
(10)将100µL终止液加入所有孔中
(11)测量450nm处的吸光度(参考波长:600-650nm)
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